Hepatitis C ialah jangkitan pada hati yang disebabkan oleh virus HCV Flaviviridae, yang terdiri daripada satu atau lebih molekul RNA. Sebagai peraturan, satu siri langkah diagnostik diambil untuk menubuhkan hepatitis C dalam pesakit. PCR adalah analisis yang mengesahkan diagnosis dengan tepat. Selalunya kesimpulan diberikan oleh doktor apabila pesakit sudah mempunyai tanda-tanda awal penyakit.
Apakah itu hepatitis C
Kerosakan hati oleh jangkitan virus yang dihantar melalui darah atau hubungan seksual dipanggil hepatitis C dalam perubatan. Agen penyebabnya ialah virus yang mengandungi RNA daripada agen berjangkit bukan selular daripada keluarga Flaviviridae. Jangkitan boleh kekal di dalam badan untuk masa yang lama tanpa menunjukkan dirinya. Oleh itu, hanya apabila mikroorganisma dikesan menggunakan ujian darah menggunakan PCR RNA RNA, hepatitis C (sebagai diagnosis) dianggap wajar.
Flavivirus tidak dihasilkan dalam sel terpencil yang ditanam secara buatan. Dalam proses pembiakan, agen berjangkit mencipta pengubahsuaian yang berbeza secara imunologi. Faktor-faktor ini menghalang badan daripada memberitindak balas perlindungan yang sesuai, dan pakar menghadapi kesukaran membangunkan vaksin yang berkesan.
Virus dihantar secara parenteral. Untuk jangkitan, ia mesti masuk dalam kuantiti yang mencukupi terus ke dalam aliran darah.
Apakah ujian yang dilakukan untuk hepatitis C
Patologi virus hati didiagnosis menggunakan ujian makmal. Kajian klinikal hepatitis C dijalankan dengan mengkaji antigen atau sebatian protein (antibodi) asing dan berbahaya dalam biomaterial pesakit, terutamanya dalam darah.
- Enzymatic immunoassay (ELISA). Kaedah ini berdasarkan pengesanan antibodi lgM dalam darah. Imunoglobulin dianggap terbesar dan merupakan pentamer. Ia menunjukkan dirinya dalam tindak balas perlindungan utama limfosit kepada bahan asing yang tidak diketahui.
- Radioimmunoassay (RIA) - penentuan kuantitatif imunoglobulin lgM menggunakan isotop radioaktif iodin berlabel.
- PCR hepatitis C - penentuan RNA virus dalam biomaterial (darah). Analisis ini mengesahkan diagnosis dengan pasti.
Ujian IgG tidak boleh dipercayai. Kehadirannya dalam serum darah boleh menunjukkan bukan sahaja kehadiran flavivirus, tetapi juga jangkitan lampau lain yang mempunyai patogen yang sama.
Apa yang menentukan analisis PCR
Tindak balas rantai polimerase (PCR) adalah berdasarkan pengenalpastian kawasan DNA khusus untuk patogen tertentu dalam sampel bahan untuk penyelidikan (epitelium, darah). Analisis memungkinkan untuk mengenal pasti organisma terkecil patogenik (virus) dengan mengesan RNA atau DNA mereka dalam bahan biologi.
Prosedur makmal untuk pengesanan antibodi Hepatitis C PCR dijalankan dalam 3 peringkat:
- Pilih. Biomaterial yang dikaji ditulenkan daripada kekotoran dan DNA diperoleh dalam fasa bergerak lajur kromatografi.
- Penguatan. Analisis dijalankan dalam kitar peranti-termostat. Ia memanaskan dan menyejukkan tabung uji dengan kitaran tertentu. Untuk satu kajian, sehingga 35 kitaran dilakukan. Hasilnya ialah bilangan serpihan DNA yang mencukupi untuk mengesan, mengenal pasti dan menilai patogen.
- Elektroforesis. Serpihan yang terhasil diletakkan dalam gel dengan ketepuan agarose yang berbeza dan elektroforesis dilakukan. Elektroferogram yang terhasil dianalisis pada komputer.
Bukan sahaja kajian PCR standard digunakan, tetapi juga analisis PCR Masa Nyata. Ini adalah diagnostik masa nyata. Kaedah ini membolehkan analisis kualitatif dan kuantitatif, yang memungkinkan untuk mengenal pasti pembentukan dan dinamik penyakit, serta menetapkan terapi yang bertujuan untuk menghapuskan punca asal patologi. PCR masa nyata juga digunakan untuk menentukan budaya tulen agen berjangkit (genotaip).
Bagaimanakah ujian tindak balas rantai polimerase dilakukan
Untuk diagnosis, sebarang cecair biologi manusia boleh digunakan. Biobahan untuk ujian hepatitis C biasanya adalah darah.
Pensampelan untuk diagnostik dijalankan dalam prosedurpejabat. Untuk mengambil darah, gunakan tabung uji pakai buang dengan bahan yang menghalang pembekuan darah. Aktiviti yang tertumpu pada mencegah penyebaran agen berjangkit membantu mengelakkan kemasukan mikroorganisma lain dari luar.
Darah untuk PCR hepatitis C diambil pada waktu pagi semasa perut kosong. Sampel dihantar segera ke makmal. Ia dibenarkan untuk menyimpan biomaterial pada suhu +4 hingga +8 darjah Celsius. Bekas dilabel dan disediakan dengan arahan. Keputusan ujian tersedia dalam masa 48 jam, kadangkala lebih awal.
Jenis PCR
Julat penggunaan tindak balas rantai polimerase agak luas. Pakar jangkitan menentukan menggunakan PCR hepatitis B, penyakit yang disebarkan oleh serangga penghisap darah, AIDS, batuk kering. Dalam onkologi, menggunakan kaedah ini, sel tumor dikesan pada peringkat awal.
Terdapat kira-kira empat belas jenis analisis. Penggunaan satu atau jenis lain bergantung pada skop dan keputusan akhir analisis. Sesetengah jenis PCR amat diperlukan apabila hasilnya diperlukan dalam masa 20 minit.
Untuk mendiagnosis hepatitis C, 3 jenis tindak balas rantai polimerase digunakan:
- Penilaian kualitatif boleh sama ada positif, menunjukkan kehadiran jangkitan dalam badan, atau negatif, menunjukkan ketiadaan flavivirus.
- PCR masa nyata (analisis kuantitatif) - menentukan RNA kuantitatif patogen dalam IU/ml.
- Genotyping ialah analisis yang mendedahkan jenis (genotip) virus.
Untuk mengenal pasti dan menentukan penyakit dengan tepat, diikuti denganketiga-tiga jenis kajian digunakan untuk menetapkan terapi optimum.
Analisis tindak balas rantai polimerase kualitatif
Analisis adalah wajib bagi setiap orang yang mempunyai ELISA yang telah mengesan antibodi kepada HCV. PCR kualitatif untuk hepatitis C ialah ujian kerentanan standard. Kaedah ini hanya bertujuan untuk pengesanan, tiada pengiraan atau pengasingan bahan lain dilakukan.
Untuk mengesan antibodi, sistem ujian khas digunakan dengan ambang sensitiviti sekurang-kurangnya 50 IU/ml. Jika antibodi dikesan, ujian penjelasan lain ditetapkan. Jika keputusan negatif, tiada ujian lanjut akan dilakukan.
Dalam sesetengah kes, keputusan negatif palsu mungkin disebabkan oleh kakitangan makmal yang tidak cekap atau reagen yang tidak berkualiti. Untuk insurans, adalah lebih baik untuk mengambil semula analisis di tempat lain.
PCR Kuantitatif
Kaedah ini digunakan untuk mengkaji secara langsung bilangan flavivirus dalam satu kitaran tindak balas. Untuk pengukuran yang tepat, serpihan DNA yang digunakan untuk penghibridan atau primer berlabel pendarfluor digunakan. Terdapat pilihan pengesanan yang menjimatkan menggunakan pewarna Hijau SYBL. Pewarna dijepit ke dalam alur kecil dalam DNA dan bertukar menjadi biru apabila disinari dengan laser.
Kepekatan ditentukan oleh penguat radas dalam setara digital. Nilai mungkin berbeza sedikit antara makmal dan oleh itu harus dibandingkan dengan nilai rujukan.
PCR Kuantitatifhepatitis C membantu memilih dos ubat yang optimum dan menentukan tempoh terapi. Kekerapan kajian bergantung pada peringkat penyakit, jenis genotip dan kursus rawatan yang ditetapkan.
Penentuan genotip
Virus hepatitis C mempunyai susunan genetik yang berubah-ubah. Banyak pengubahsuaian menjadikannya mustahil untuk mencipta vaksin, dan juga merumitkan terapi. Sebanyak 11 genotip dan 100 subjenis telah dikenal pasti dan direkodkan. Di negara-negara bekas USSR, pada orang yang dijangkiti hepatitis C, PCR terutamanya mengesan genotip 1b dan 3.
Dengan kehadiran mana-mana genotip, sirosis atau kanser hati boleh bermain-main. Itulah sebabnya sangat penting untuk mengesan virus tepat pada masanya.
Bagi sesetengah pesakit, ubat tertentu yang direka untuk melawan HCV adalah toksik. Genotaip membolehkan anda menentukan jenis protein dan menetapkan ubat yang berkesan.
Dalam keputusan ujian menaip terdapat nombor dengan huruf Latin huruf kecil yang menunjukkan genotip virus. Jika HCV dikesan tetapi tidak ditaip, ini bermakna orang itu mempunyai genotip yang tidak tipikal untuk kawasan geografi tertentu.
Hasil analisis
Doktor berurusan dengan mentafsir keputusan. Hanya data daripada beberapa kajian (bersama dengan anamnesis dan pemeriksaan) boleh memberikan gambaran sebenar keseluruhan sejarah perubatan.
- Pada orang yang sihat, ujian untuk tindak balas kualitatif dalam biobahan tidak mengesan apa-apa. Jika nilai "dikesan" ditunjukkan, jangkitan disahkan, dan pesakitmemerlukan diagnosis lanjut diikuti dengan rawatan.
- Penentuan bilangan agen berjangkit memungkinkan untuk menilai beban virus pada badan. Biasanya, PCR kuantitatif hepatitis C tidak mengesan patogen. Penunjuk sehingga 810^5 dianggap sebagai beban rendah dan, dengan terapi yang betul, menjamin hasil yang menggalakkan. Nilai yang lebih tinggi memerlukan pemeriksaan mendalam dan penentuan terapi jangka panjang, untuk hasil positif yang tiada siapa dapat menjamin.
- Hasil genotaip positif menunjukkan genotip mana yang diiktiraf. Keputusan negatif menunjukkan sama ada ketiadaan flavivirus atau kehadiran genotip yang tidak tipikal untuk rantau ini.
Apakah yang ditunjukkan oleh ujian PCR positif
Sebarang penyakit serius memerlukan diagnosis menyeluruh. PCR hepatitis C positif mengesahkan diagnosis, tetapi ramalan hanya boleh dibuat selepas kajian makmal dan instrumental tambahan.
Pengesanan virus tidak memberikan gambaran lengkap tentang patologi. Ia adalah perlu untuk mengenal pasti jenis dan sifatnya, untuk menentukan bagaimana ia mempengaruhi hati dan organ lain. Pengesanan awal HCV selalunya mempunyai hasil terapeutik yang menggalakkan.
PCR negatif dengan ELISA positif
Apabila memerhatikan simptom ciri kerosakan hati, terdapat kebarangkalian tinggi bahawa jangkitan telah memasuki badan. Oleh itu, anda perlu menghubungi pakar hepatologi atau pakar penyakit berjangkit. Semasa temu duga, pakar akan mengumpul anamnesis dan menetapkan pemeriksaan yang diperlukan.
Jikakeputusan kajian mengenai hepatitis C PCR adalah negatif, dan enzim immunoassay adalah positif, ini menunjukkan kehadiran antibodi kepada flavivirus dalam darah. Ini biasanya berlaku apabila jangkitan memasuki badan dalam jumlah yang kecil, jadi sistem imun mengatasinya sendiri. Tetapi orang seperti itu masih dianggap dijangkiti dan perlu diperiksa setiap 6 bulan. Jika, dengan keputusan ujian sedemikian, seseorang itu dinafikan pemeriksaan perubatan percuma, adalah lebih baik untuk mengambil PCR dengan bayaran untuk mengekalkan kesihatan, dan jika keputusannya positif, hubungi pakar untuk diagnosis dan rawatan.
Kebaikan dan keburukan kaedah
Apabila membuat diagnosis hepatitis C, PCR mempunyai beberapa kelebihan:
- Pengesanan awal patogen.
- Takrif virus yang tepat.
- Kecekapan diagnostik.
- Kadar ralat minimum.
- Sensitiviti tinggi.
Kelemahan kaedah:
- Kos analisis yang tinggi. Ujian itu memerlukan peralatan mahal, reagen dan kakitangan perubatan yang berkelayakan tinggi. Kesemuanya menjumlahkan sehingga jumlah yang banyak.
- Keperluan ketat untuk pengangkutan biomaterial.
Rawatan radang hati
Analisis PCR untuk virus hepatitis C dianggap asas kepada diagnosis, tetapi tidak muktamad. Untuk terapi menjadi berkesan, beberapa makmal tambahan dan kajian instrumental diperlukan. Selepas melepasi semualangkah diagnostik yang doktor menetapkan rawatan:
- Diet 5 ditetapkan.
- Alkohol dikecualikan sepenuhnya.
- Penerimaan bersama Interferon dan Ribavirin selama 25 hari.
- Kursus hepaprotectors "Essentiale", "Karsil", "Phosphogliv".
- Dalam kes khas, plasmapheresis diskret digunakan.
Ubat yang ditetapkan oleh pakar hepatologi digunakan dengan kerap, tanpa mengubah dos. Tempoh pengambilan ubat ditentukan oleh doktor selepas lulus ujian kawalan. Selepas melengkapkan kursus terapi, anda mesti melawat doktor setiap enam bulan.
Diagnostik PCR membolehkan mengenal pasti agen penyebab hepatitis C pada peringkat awal. Ini menyumbang kepada keberkesanan terapi dan pencegahan peralihan penyakit kepada bentuk berbahaya seperti sirosis dan karsinoma hepatoselular.
